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在生物技术和生物医药领域,蛋白质表达和生产是广泛应用于生命科学研究和药物开发中的重要环节。为了高效产生目标蛋白质,科研人员常常利用各种工具细胞类型进行表达,其中选择合适的工具细胞至关重要。本期将主要给大家介绍在悬浮培养大规模生产中,常用的几种细胞类型。CHO细胞(Chinese Hamster Ovary,中国仓鼠卵巢细胞)是来源于中国仓鼠(Chinese hamster)的一种哺乳动物细胞系。它们是*常用的哺乳动物细胞系之一,在生物技术和生物医药领域中被广泛应用于蛋白质表达和生产、抗体生产、药物筛选等领域。CHO细胞具有以下几个特点使其成为理想的工具细胞:1. 稳定的染色体结构:CHO细胞的染色体结构相对稳定,不易发生染色体重排和变异,有利于长期稳定的蛋白质表达。2. 良好的生长特性:CHO细胞生长速度适中,易于培养和扩增,可实现大规模的细胞培养和生产。3. 高表达水平:CHO细胞对外源基因的表达能力较强,能够产生高水平的目标蛋白质。4. 易于遗传改造:CHO细胞可以进行遗传改造,如基因敲除、基因编辑等,有利于优化蛋白质表达和生产。5. 较低的病毒污染风险:相比于人类细胞系,CHO细胞对病毒感染的敏感性较低,降低了病毒污染的风险。CHO细胞可以通过稳定转染或瞬时转染等方式进行外源基因的表达,常用于生产重组蛋白、抗体、病毒样颗粒等生物制品。其优良的表达特性和相对简单的培养条件使其成为生物医药领域中不可或缺的重要工具之一。 293细胞,如293F细胞,一种来源于人类胚胎肾细胞的细胞系,是HEK293细胞的一种变种。与传统的HEK293细胞相比,293F细胞是一种悬浮生长的细胞系,适用于大规模蛋白质表达和生产。这种细胞系*初由Invitrogen公司开发,并已被广泛用于生物技术和生物医药领域的蛋白质表达、抗体生产、病毒包装等方面。293F细胞具有以下特点:1. 悬浮生长:与传统的HEK293细胞相比,293F细胞是一种悬浮生长的细胞系,可以在培养基中自由悬浮,适用于大规模生产需求。2. 高表达水平:293F细胞对外源基因的表达能力较强,能够产生高水平的目标蛋白质。3. 易于扩增和操作:由于是悬浮生长的细胞系,293F细胞相对于贴壁生长的细胞更易于大规模扩增和操作。4. 适用于病毒包装:293F细胞不仅适用于蛋白质表达,还常被用于病毒包装,例如用于制备腺相关病毒(Adenovirus)和 Lentivirus 等。5. 稳定性:经过长期培养和优化,293F细胞已经具备了相对稳定的表达和生长特性。综上所述,293F细胞是一种在生物技术和生物医药领域中被广泛应用的重要工具细胞系,适用于大规模蛋白质表达和生产,以及病毒包装等应用。 昆虫细胞,如SF9细胞是一种来源于昆虫Spodoptera frugiperda的细胞系,常用于昆虫表达系统进行蛋白质的高水平表达。这种细胞系*初是由Ian M. Smith等人于1983年首次从Spodoptera frugiperda卵巢中分离出来,并被广泛用于生物技术和生物医药领域。SF9细胞具有以下特点:1. 适用于昆虫表达系统:SF9细胞是昆虫表达系统的重要组成部分,可用于进行蛋白质的高效表达和生产。2. 易于培养和操作:SF9细胞的培养和操作相对简单,适用于大规模的细胞培养和生产。3. 高表达水平:SF9细胞对外源基因的表达能力较强,能够产生高水平的目标蛋白质。4. 适用于病毒样颗粒生产:除了蛋白质表达,SF9细胞还常被用于病毒样颗粒的生产,例如 Baculovirus 病毒样颗粒。5. 适应性强:SF9细胞对培养条件的适应性较强,能够在不同的培养条件下生长和表达。SF9细胞在生物技术领域中被广泛用于蛋白质的表达和生产,特别适用于需要大量高纯度蛋白质的研究和应用。 酵母是一类单细胞真菌,广泛存在于自然界中,是生物研究中常用的模式生物之一。在蛋白质生产领域,酵母也扮演着重要的角色,特别是酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)和毕赤酵母(Pichia pastoris),它们被广泛应用于外源蛋白表达、重组蛋白生产等方面。以下是酵母在蛋白质生产中的特点和应用:1. 折叠能力强:酵母细胞具有较好的蛋白质折叠和修饰能力,适合表达复杂的蛋白质。2. 易于培养:酵母细胞生长速度较快,培养简便,可以在简单的培养基上进行大规模的生产。3. 分泌表达:毕赤酵母等某些酵母菌株可实现蛋白质的分泌表达,易于后续的纯化和提取。4. 糖基化修饰:毕赤酵母等酵母菌株具有一定的糖基化修饰能力,适合用于需要此类修饰的蛋白质表达。5. 适用于高密度发酵:酿酒酵母等菌株适合进行高密度发酵,可实现大规模的蛋白质生产。由于酵母在蛋白质生产中的诸多优势,它被广泛应用于生物制药、工业生产和生命科学研究领域。 大肠杆菌(Escherichia coli,简称E. coli)是一种常见的革兰氏阴性杆菌,属于原核生物,是一种广泛存在于自然界中的细菌。大肠杆菌在蛋白质生产中的特点:1. 高表达效率:大肠杆菌具有高表达外源基因的能力,易于进行基因操纵并实现蛋白质的高效表达。2. 简单培养条件:大肠杆菌生长速度快,可以在简单的培养基中迅速增殖,并且培养成本较低。3. 易于扩大规模:大肠杆菌可以在大规模发酵中进行高密度的生长和蛋白质表达,适用于工业化生产。尽管大肠杆菌在蛋白质表达中具有诸多优势,但同时也存在一些局限性,例如无法正确折叠某些复杂蛋白以及无法进行糖基化等。 综上所述,不同类型的细胞在特定情况下都能展现出各自的优势和应用选择。然而,这些细胞可能需要更高的实验要求、更复杂的培养条件以及更高的成本。因此,在选择使用时,需要根据目标蛋白的特性、生产要求和实际需求进行综合考虑,以找到*适合的表达系统。

每一个科研人都深知原始数据的重要性,不管是杂志社还是审稿人,对实验的原始记录都有明确要求,比如PloS One、Neuroscience等权威期刊都要求在审稿或返修阶段时提交原始数据,也有不少文章由于缺少原始数据或原始数据存疑面临被撤稿的危险,对于科研人来说*痛苦的事情莫过于原始数据的丢失,多年的努力付之一炬。 这里将为大家介绍如何使用UEV system对原始数据进行自动备份,保护你的原始记录,不会丢失。STEP1:设置备份路径点击“仪器管理”,“数据库管理”在“备份参数”下设置“备份路径”,注意不要选择C盘STEP2:编辑“备份计划”点击“备份”,编辑“备份计划”关闭禁用备份计划,并跟据需要选择备份间隔时间,日,周,月,此图以周为例,选择备份时间选择备份文件数量,点击“Finish”只有备份的文件此处才可恢复哦

无菌操作是细胞培养中至关重要的一环,很多科研工作者在细胞培养的过程中都会遇到细胞反复被污染的情况,我们一起来看看,无菌操作中,有哪些需要注意的小细节吧。1. 设置专用细胞间,有条件的情况下,设立无菌操作间和缓冲间;无菌室内的地面、墙壁平整,不易藏污纳垢,便于清洗;无菌室应保持清洁,严禁堆放杂物,以防污染。2. 无菌操作间备有常用消毒剂,方便使用。如70%酒精,0.1%新洁尔灭溶液等。细胞间应保持常年干净清洁,地面,桌面等,需用消毒剂定期消毒,并且需紫外灯照射。3. 实验所用物品,如枪头,移液管,培养瓶,需无菌包装,并存放在指定指定地点,开封后需放置在紫外消毒后的超净工作台中,并尽快使用完。4. 细胞培养液,以及其他试剂在使用前,确保均为无菌试剂,开启后需密封置于冷藏保存,并尽快使用。5. 进入细胞间工作前,需先经紫外照射至少15min以上,超净工作台需经过同样照射处理,有条件的实验室在缓冲间更换专用工作服、鞋、帽子、口罩和手套(或用酒精再次擦拭双手)。6. 从培养箱中取出细胞培养物,在开启的超净工作台中进行操作,操作过程中,务必注意,枪头,移液管等,不可接触除培养液外其他任何物体。操作过程中,如果有液体滴落在台面上,务必用消毒液擦拭干净。所有进出超净台的物品,务必喷洒酒精进行消毒,开始工作后,双手不得离开超净工作台,离开后,同样需要喷洒酒精消毒。7. 尽量减少试剂瓶或培养瓶的开口时间和次数,细胞培养瓶在超净台中打开后,瓶盖应口朝下放置在工作台中,主要是防治超净台的灰尘等落入。开口应在酒精灯附近,瓶口及瓶盖需酒精灯外焰轻微灼烧消毒。8. 做完实验后清理操作台,用消毒剂擦拭台面及操作台上的物品,为下一次实验做好准备。9. 定期对培养箱进行紫外照射,酒精擦拭消毒,有培养液倾撒,务必清洁干净10. 定期对超净工作台,培养箱,以及细胞间的过滤系统检查,并更换过滤器。11. 选择合格的无菌培养耗材以及品质优良的培养箱。永联生物生产的叠加式恒温振荡器具有以下特点,为您的细胞无菌保价护航●  双向紫外灭菌,减少杀菌死角。●  可高压水冲洗内腔底部及摇板,清洁更加高效方便。●  多组高效过滤器设计,防止气体杂质与污染。●  外翻式轨道设计,进一步减少清洁死角。●  高湿防锈、防冷凝水,杜绝微生物箱内生长。此外●  进口变频压缩机,温度均一性±0.3 ℃。●  三轴偏心平衡机芯,稳定可靠,使用寿命长。●  超视角彩色电容触控屏。●  全自动除霜功能。●  原装进口CO2红外传感器,控制精确,响应灵敏。可保证细胞的良好生长,为下一步实验提供可靠保障。另有磁力驱动型号,运行更加平稳,剪切力更低,细胞生长状态更佳。永联生物为您提供规格不同的培养瓶,为您提供更多选择。

好的维护,将会大大延长设备的使用寿命,那么在UEV蛋白纯化系统日常的使用中,有哪些注意事项呢1 日常维护1. 清洁擦拭外表,防止试剂或结晶的盐腐蚀设备。2. 使用完毕,须用水将系统冲洗干净,之后再用20%乙醇清洗系并保存所有的流路。*注意LOOP环在使用结束后,也需要用水进行清洗,否则残存的溶液将会影响下次进行的实验。3. 更换缓冲液时,需排尽泵头里的残存气泡,否则会影响流速的准确性。 2每周维护1. 定期使用泵冲洗和系统冲洗(配柱位阀,未配柱位阀需手动设定程序)进行在线液路清洗2. 更换泵后管中的20%乙醇。保证管路浸入液面以下。3每月维护定期需对沉子滤头、在线过滤器,进行超声清洗。(如有甘油或其他黏性强易析出晶体的溶液要提高频率),具体操作方法,请同永联生物取得联系。 

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