无菌操作是细胞培养中至关重要的一环，很多科研工作者在细胞培养的过程中都会遇到细胞反复被污染的情况，我们一起来看看，无菌操作中，有哪些需要注意的小细节吧。

1. 设置专用细胞间，有条件的情况下，设立无菌操作间和缓冲间；无菌室内的地面、墙壁平整，不易藏污纳垢，便于清洗；无菌室应保持清洁，严禁堆放杂物，以防污染。

2. 无菌操作间备有常用消毒剂，方便使用。如70％酒精，0.1％新洁尔灭溶液等。细胞间应保持常年干净清洁，地面，桌面等，需用消毒剂定期消毒，并且需紫外灯照射。

3. 实验所用物品，如枪头，移液管，培养瓶，需无菌包装，并存放在指定指定地点，开封后需放置在紫外消毒后的超净工作台中，并尽快使用完。

4. 细胞培养液，以及其他试剂在使用前，确保均为无菌试剂，开启后需密封置于冷藏保存，并尽快使用。

5. 进入细胞间工作前，需先经紫外照射至少15min以上，超净工作台需经过同样照射处理，有条件的实验室在缓冲间更换专用工作服、鞋、帽子、口罩和手套(或用酒精再次擦拭双手)。

6. 从培养箱中取出细胞培养物，在开启的超净工作台中进行操作，操作过程中，务必注意，枪头，移液管等，不可接触除培养液外其他任何物体。操作过程中，如果有液体滴落在台面上，务必用消毒液擦拭干净。所有进出超净台的物品，务必喷洒酒精进行消毒，开始工作后，双手不得离开超净工作台，离开后，同样需要喷洒酒精消毒。

7. 尽量减少试剂瓶或培养瓶的开口时间和次数，细胞培养瓶在超净台中打开后，瓶盖应口朝下放置在工作台中，主要是防治超净台的灰尘等落入。开口应在酒精灯附近，瓶口及瓶盖需酒精灯外焰轻微灼烧消毒。

8. 做完实验后清理操作台，用消毒剂擦拭台面及操作台上的物品，为下一次实验做好准备。

9. 定期对培养箱进行紫外照射，酒精擦拭消毒，有培养液倾撒，务必清洁干净

10. 定期对超净工作台，培养箱，以及细胞间的过滤系统检查，并更换过滤器。

11. 选择合格的无菌培养耗材以及品质优良的培养箱。

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