在生物技术和生物医药领域，蛋白质表达和生产是广泛应用于生命科学研究和药物开发中的重要环节。为了高效产生目标蛋白质，科研人员常常利用各种工具细胞类型进行表达，其中选择合适的工具细胞至关重要。本期将主要给大家介绍在悬浮培养大规模生产中，常用的几种细胞类型。CHO细胞（Chinese Hamster Ovary，中国仓鼠卵巢细胞）是来源于中国仓鼠（Chinese hamster）的一种哺乳动物细胞系。它们是＊常用的哺乳动物细胞系之一，在生物技术和生物医药领域中被广泛应用于蛋白质表达和生产、抗体生产、药物筛选等领域。CHO细胞具有以下几个特点使其成为理想的工具细胞：1. 稳定的染色体结构：CHO细胞的染色体结构相对稳定，不易发生染色体重排和变异，有利于长期稳定的蛋白质表达。2. 良好的生长特性：CHO细胞生长速度适中，易于培养和扩增，可实现大规模的细胞培养和生产。3. 高表达水平：CHO细胞对外源基因的表达能力较强，能够产生高水平的目标蛋白质。4. 易于遗传改造：CHO细胞可以进行遗传改造，如基因敲除、基因编辑等，有利于优化蛋白质表达和生产。5. 较低的病毒污染风险：相比于人类细胞系，CHO细胞对病毒感染的敏感性较低，降低了病毒污染的风险。CHO细胞可以通过稳定转染或瞬时转染等方式进行外源基因的表达，常用于生产重组蛋白、抗体、病毒样颗粒等生物制品。其优良的表达特性和相对简单的培养条件使其成为生物医药领域中不可或缺的重要工具之一。 293细胞，如293F细胞，一种来源于人类胚胎肾细胞的细胞系，是HEK293细胞的一种变种。与传统的HEK293细胞相比，293F细胞是一种悬浮生长的细胞系，适用于大规模蛋白质表达和生产。这种细胞系＊初由Invitrogen公司开发，并已被广泛用于生物技术和生物医药领域的蛋白质表达、抗体生产、病毒包装等方面。293F细胞具有以下特点：1. 悬浮生长：与传统的HEK293细胞相比，293F细胞是一种悬浮生长的细胞系，可以在培养基中自由悬浮，适用于大规模生产需求。2. 高表达水平：293F细胞对外源基因的表达能力较强，能够产生高水平的目标蛋白质。3. 易于扩增和操作：由于是悬浮生长的细胞系，293F细胞相对于贴壁生长的细胞更易于大规模扩增和操作。4. 适用于病毒包装：293F细胞不仅适用于蛋白质表达，还常被用于病毒包装，例如用于制备腺相关病毒（Adenovirus）和 Lentivirus 等。5. 稳定性：经过长期培养和优化，293F细胞已经具备了相对稳定的表达和生长特性。综上所述，293F细胞是一种在生物技术和生物医药领域中被广泛应用的重要工具细胞系，适用于大规模蛋白质表达和生产，以及病毒包装等应用。 昆虫细胞，如SF9细胞是一种来源于昆虫Spodoptera frugiperda的细胞系，常用于昆虫表达系统进行蛋白质的高水平表达。这种细胞系＊初是由Ian M. Smith等人于1983年首次从Spodoptera frugiperda卵巢中分离出来，并被广泛用于生物技术和生物医药领域。SF9细胞具有以下特点：1. 适用于昆虫表达系统：SF9细胞是昆虫表达系统的重要组成部分，可用于进行蛋白质的高效表达和生产。2. 易于培养和操作：SF9细胞的培养和操作相对简单，适用于大规模的细胞培养和生产。3. 高表达水平：SF9细胞对外源基因的表达能力较强，能够产生高水平的目标蛋白质。4. 适用于病毒样颗粒生产：除了蛋白质表达，SF9细胞还常被用于病毒样颗粒的生产，例如 Baculovirus 病毒样颗粒。5. 适应性强：SF9细胞对培养条件的适应性较强，能够在不同的培养条件下生长和表达。SF9细胞在生物技术领域中被广泛用于蛋白质的表达和生产，特别适用于需要大量高纯度蛋白质的研究和应用。 酵母是一类单细胞真菌，广泛存在于自然界中，是生物研究中常用的模式生物之一。在蛋白质生产领域，酵母也扮演着重要的角色，特别是酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）和毕赤酵母（Pichia pastoris），它们被广泛应用于外源蛋白表达、重组蛋白生产等方面。以下是酵母在蛋白质生产中的特点和应用：1. 折叠能力强：酵母细胞具有较好的蛋白质折叠和修饰能力，适合表达复杂的蛋白质。2. 易于培养：酵母细胞生长速度较快，培养简便，可以在简单的培养基上进行大规模的生产。3. 分泌表达：毕赤酵母等某些酵母菌株可实现蛋白质的分泌表达，易于后续的纯化和提取。4. 糖基化修饰：毕赤酵母等酵母菌株具有一定的糖基化修饰能力，适合用于需要此类修饰的蛋白质表达。5. 适用于高密度发酵：酿酒酵母等菌株适合进行高密度发酵，可实现大规模的蛋白质生产。由于酵母在蛋白质生产中的诸多优势，它被广泛应用于生物制药、工业生产和生命科学研究领域。 大肠杆菌（Escherichia coli，简称E. coli）是一种常见的革兰氏阴性杆菌，属于原核生物，是一种广泛存在于自然界中的细菌。大肠杆菌在蛋白质生产中的特点：1. 高表达效率：大肠杆菌具有高表达外源基因的能力，易于进行基因操纵并实现蛋白质的高效表达。2. 简单培养条件：大肠杆菌生长速度快，可以在简单的培养基中迅速增殖，并且培养成本较低。3. 易于扩大规模：大肠杆菌可以在大规模发酵中进行高密度的生长和蛋白质表达，适用于工业化生产。尽管大肠杆菌在蛋白质表达中具有诸多优势，但同时也存在一些局限性，例如无法正确折叠某些复杂蛋白以及无法进行糖基化等。 综上所述，不同类型的细胞在特定情况下都能展现出各自的优势和应用选择。然而，这些细胞可能需要更高的实验要求、更复杂的培养条件以及更高的成本。因此，在选择使用时，需要根据目标蛋白的特性、生产要求和实际需求进行综合考虑，以找到＊适合的表达系统。

每一个科研人都深知原始数据的重要性，不管是杂志社还是审稿人，对实验的原始记录都有明确要求，比如PloS One、Neuroscience等权威期刊都要求在审稿或返修阶段时提交原始数据，也有不少文章由于缺少原始数据或原始数据存疑面临被撤稿的危险，对于科研人来说＊痛苦的事情莫过于原始数据的丢失，多年的努力付之一炬。 这里将为大家介绍如何使用UEV system对原始数据进行自动备份，保护你的原始记录，不会丢失。STEP1：设置备份路径点击“仪器管理”，“数据库管理”在“备份参数”下设置“备份路径”，注意不要选择C盘STEP2：编辑“备份计划”点击“备份”，编辑“备份计划”关闭禁用备份计划，并跟据需要选择备份间隔时间，日，周，月，此图以周为例，选择备份时间选择备份文件数量，点击“Finish”只有备份的文件此处才可恢复哦

无菌操作是细胞培养中至关重要的一环，很多科研工作者在细胞培养的过程中都会遇到细胞反复被污染的情况，我们一起来看看，无菌操作中，有哪些需要注意的小细节吧。1. 设置专用细胞间，有条件的情况下，设立无菌操作间和缓冲间；无菌室内的地面、墙壁平整，不易藏污纳垢，便于清洗；无菌室应保持清洁，严禁堆放杂物，以防污染。2. 无菌操作间备有常用消毒剂，方便使用。如70％酒精，0.1％新洁尔灭溶液等。细胞间应保持常年干净清洁，地面，桌面等，需用消毒剂定期消毒，并且需紫外灯照射。3. 实验所用物品，如枪头，移液管，培养瓶，需无菌包装，并存放在指定指定地点，开封后需放置在紫外消毒后的超净工作台中，并尽快使用完。4. 细胞培养液，以及其他试剂在使用前，确保均为无菌试剂，开启后需密封置于冷藏保存，并尽快使用。5. 进入细胞间工作前，需先经紫外照射至少15min以上，超净工作台需经过同样照射处理，有条件的实验室在缓冲间更换专用工作服、鞋、帽子、口罩和手套(或用酒精再次擦拭双手)。6. 从培养箱中取出细胞培养物，在开启的超净工作台中进行操作，操作过程中，务必注意，枪头，移液管等，不可接触除培养液外其他任何物体。操作过程中，如果有液体滴落在台面上，务必用消毒液擦拭干净。所有进出超净台的物品，务必喷洒酒精进行消毒，开始工作后，双手不得离开超净工作台，离开后，同样需要喷洒酒精消毒。7. 尽量减少试剂瓶或培养瓶的开口时间和次数，细胞培养瓶在超净台中打开后，瓶盖应口朝下放置在工作台中，主要是防治超净台的灰尘等落入。开口应在酒精灯附近，瓶口及瓶盖需酒精灯外焰轻微灼烧消毒。8. 做完实验后清理操作台，用消毒剂擦拭台面及操作台上的物品，为下一次实验做好准备。9. 定期对培养箱进行紫外照射，酒精擦拭消毒，有培养液倾撒，务必清洁干净10. 定期对超净工作台，培养箱，以及细胞间的过滤系统检查，并更换过滤器。11. 选择合格的无菌培养耗材以及品质优良的培养箱。永联生物生产的叠加式恒温振荡器具有以下特点，为您的细胞无菌保价护航●  双向紫外灭菌，减少杀菌死角。●  可高压水冲洗内腔底部及摇板，清洁更加高效方便。●  多组高效过滤器设计，防止气体杂质与污染。●  外翻式轨道设计，进一步减少清洁死角。●  高湿防锈、防冷凝水，杜绝微生物箱内生长。此外●  进口变频压缩机，温度均一性±0.3 ℃。●  三轴偏心平衡机芯，稳定可靠，使用寿命长。●  超视角彩色电容触控屏。●  全自动除霜功能。●  原装进口CO2红外传感器，控制精确，响应灵敏。可保证细胞的良好生长，为下一步实验提供可靠保障。另有磁力驱动型号，运行更加平稳，剪切力更低，细胞生长状态更佳。永联生物为您提供规格不同的培养瓶，为您提供更多选择。

脂质体（Liposome）是由脂质双分子层所形成的一种超微球形载体制剂，是纳米载药系统的典型代表。当两性分子如磷脂分散于水相时，分子的疏水尾部聚集在一起，亲水头部暴露在水相，形成具有双分子层结构的封闭囊泡。在囊泡内水相和双分子膜内可以包裹多种不同极性的药物。脂质体作为药物载体，具有高度的靶向性，能有效保护被包裹药物并控制药物在体内的释放速度，显著提高药物治疗指数，降低药物不良反应。基于上述诸多优势，脂质体经过数十年的发展已被广泛应用于抗肿瘤、镇痛消炎、抗生素、麻醉剂、重组蛋白以及核酸类疫苗药物的递送系统。当脂质体结构用于载药时，脂溶性药物一般由磷脂双分子层承载，水溶性药物一般则被包封于脂质体囊泡内。随着2020年新型冠状病毒疫情在全球的爆发，辉瑞 （Pfizer）和莫德纳（Moderna）先后研发的mRNA疫苗引起了全球制药行业的极大关注。而纳米脂质体（LNPs）作为mRNA疫苗递送系统的核心组成部分，由于其配方工艺与产品的疗效以及安全性息息相关，自然也成为生产企业进行产品质控的研发重点，以及仿制药企业开展反向工程的设计关键。脂质体的主要制备方法：（1）薄膜分散法：这是一种经典的制备方法，它可形成多室脂质体，经超声处理后得到小单室脂质体。（2）逆相蒸发法：系将磷脂等脂溶性成分溶于有机溶剂如氯仿、二氯甲烷中，再按一定比例与含药的缓冲液混合、乳化，然后减压蒸去有机溶剂即可形成脂质体。（3）超声分散法：超声分散法有两种：探针超声法（Direct probe sonicator）和水浴超声法(Indirect bath sonicator)。探针超声法是制备小单室脂质体的常用方法，它可破坏多室脂质体形成更为均一的小单室脂质体。（4）高压均质法：主要依托高压均质机的作用，将类脂质材料溶解后加入含有表面活性剂的水相中，形成初乳后再经高压均质机处理，即可形成粒径小且分布均匀的脂质体溶液。该法制备的脂质体粒径小且分布范围窄。这种方法重复性好，可大规模生产；颗粒均匀，稳定性好。制备的脂质体具有粒径小、分布窄的优点，且包封率高，稳定性高，可实现规模化、连续化的生产。均质前后粒径检测高压均质机是一种可以使悬浊液状态的物料在超高压作用下，高速流过具有特殊内部结构的容腔（高压均质腔），使物料发生物理、化学、结构性质等一系列变化，＊终达到均质的效果。物料通过柱塞泵吸入并加压， 在柱塞作用下进入压力大小可调节的阀组中，经过特定宽度的限流缝隙（工作区）后，瞬间失压的物料以极高的流速（1000 至 1500 米/秒）喷出， 碰撞在阀组件之一的碰撞环上， 产生了三种效应：撞击效应、 剪切效应、 空穴效应。使物质均质、 分散、 乳化、 颗粒纳米化。广泛应用于乳制品，饮品，食品，化工，中成药，化妆品，涂料，纳米纤维素等。结果展示我们可以看出，在经过1200bar 3次循环的样品呈现出半透明状，达到客户要求。

小球藻（chlorella）是一种球形单细胞绿藻，分布极广，其细胞中含有丰富的营养物质，细胞中蛋白质含量可达60~70%，氨基酸种类齐全，富含多糖和不饱和脂肪酸等活性物质，具有抗氧化、增强免疫力、降血脂等保健功能；目前已广泛应用于医药、食品、饲料以及化妆品等领域。小球藻具有多种生物功能，但由于细胞壁厚且坚硬，很难破碎，细胞内的有效成分不易释放，给实际应用增加了很高的成本，使其价值的发挥受到很大限制。目前，对于小球的细胞破壁方法，传统的方法有两种，种为超声波法，一种为反复冻融法，超声波法破壁率高，但是对于工业化生产无法进行；而反复冻融法，对于温度控制严格,生产效率低。因此，一种温和而高效的小球藻破碎方法对于科研和生产来说，十分重要，也是众多科研工作者关注的焦点。高压均质机是一种可以使悬浊液状态的物料在超高压作用下，高速流过具有特殊内部结构的容腔（高压均质腔），使物料发生物理、化学、结构性质等一系列变化，＊终达到均质的效果。物料通过柱塞泵吸入并加压， 在柱塞作用下进入压力大小可调节的阀组中，经过特定宽度的限流缝隙（工作区）后，瞬间失压的物料以极高的流速（1000 至 1500 米/秒）喷出， 碰撞在阀组件之一的碰撞环上， 产生了三种效应：撞击效应、 剪切效应、 空穴效应。使物质均质、 分散、 乳化、 颗粒纳米化。广泛应用于乳制品，饮品，食品，化工，中成药，化妆品，涂料，纳米纤维素等。本次实验使用永联生物生产的UH-120高压均质机，配自主研发的金刚石破碎阀，对小球藻进行破碎。实验结果如下。实验结果可以看出，在1200bar下破碎两次已经有非常明显的破碎效果，1400bar下破碎两次细胞碎片也几乎完全破碎。实验证明，使用高压均质机破碎小球藻是一种行之可效的方法。